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27 人阅读发布时间:2026-09-02 10:51
干扰慢病毒是以慢病毒(Lentivirus)为载体,通过表达shRNA或miRNA,在哺乳动物细胞中实现靶基因转录后沉默的基因干扰工具。慢病毒干扰载体主要应用两种常规的pol III启动子H1和U6,启动活性均位于+1转录起始位点的上游,Pol III启动子表达广泛,能高效表达shRNA。该产品基于第三代自失活(self-inactivating, SIN)慢病毒载体系统,具备感染分裂与非分裂细胞、整合至宿主基因组实现长期稳定表达、以及低免疫原性等核心优势,是目前体外基因功能研究及体内基因治疗探索中最常用的RNAi递送工具之一。

图1 慢病毒载体干扰靶点的mRNA水平

图2 慢病毒载体干扰靶点的蛋白水平
RNAi 实验最怕的不是“没敲低”,而是——qPCR 掉了80%,WB条带纹丝不动;或者表型出来了,审稿人一句“请补充蛋白水平验证”把你打回重做。
开学季来临,实验项目继续推进,这次我们带来了全新的慢病毒干扰套餐:不是只保 mRNA,而是以目的蛋白下降(eg. Western Blot结果)作为强力售后保障。
为什么是“保蛋白”而不是“保 mRNA”
shRNA经Pol III启动子(U6/H1)转录,由 Dicer加工成siRNA进入RISC复合体降解靶 mRNA,这是经典路径。但大量文献与实测表明:
✅ mRNA下降≠蛋白同步下降(翻译效率、蛋白半衰期会缓冲);
✅ 强U6驱动在某些原代细胞(如骨髓、原代神经元)有Pol III 毒性;
✅ 审稿人对“仅qPCR验证”的RNAi证据接受度逐年降低。
所以我们把套餐终点锁在蛋白水平:感染效率≥80% 前提下,至少 1 条 shRNA 在 WB 上呈现明显敲减,否则免费重做或退款。
技术细节:让“保蛋白”不是口号
启动子选型:多种Pol III启动子可选,U6、H1、7SK等。
序列设计:19–23 nt正向 + 9 nt loop(TTCAAGAGA)+ 反向互补,避开3′UTR SNP区与miR种子区。
多靶冗余:3条独立靶位,任1条蛋白水平达标即履约;若3条均不理想,免费重设计一轮。
开学季附加权益
2026.9.1–10.31
✅下单3保1套餐送Polybrene 1管+对照病毒1mL;
✅下单3混1套餐送Polybrene 1管+对照病毒1mL;